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當(dāng)前位置:首頁(yè)   >  產(chǎn)品中心  >  PCR試劑盒  >  PCR檢測(cè)試劑盒  >  50次羊仰口線蟲PCR檢測(cè)試劑盒廠家

羊仰口線蟲PCR檢測(cè)試劑盒廠家

簡(jiǎn)要描述:羊仰口線蟲PCR檢測(cè)試劑盒廠家上海帛科生物相關(guān)產(chǎn)品:假絲酵母屬 Candida sp.DU 145, 人前列腺細(xì)胞

木耳 Auricularia auricula鼠李糖桿菌 Lactobacillus rhamnosus

血管緊張素原(AGT)重組蛋白英文名稱:Recombinant Angiotensinogen (AGT)

人高分化胃細(xì)胞英文名稱:NCI-N87

大鼠主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞

  • 產(chǎn)品型號(hào):50次
  • 廠商性質(zhì):經(jīng)銷商
  • 更新時(shí)間:2023-12-16
  • 訪  問  量:345

詳細(xì)介紹

技術(shù)原理:
 DNA的半保留復(fù)制是生物進(jìn)化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解鏈成單鏈,在DNA聚合酶與啟動(dòng)子的參與下,根據(jù)堿基互補(bǔ)配對(duì)原則復(fù)制成同樣的兩分子挎貝。
       在聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn),DNA在高溫時(shí)也可以發(fā)生變性解鏈,當(dāng)溫度降低后又可以復(fù)性成為雙鏈。因此,通過溫度變化控制DNA的變性和復(fù)性,并設(shè)計(jì)引物做啟動(dòng)子,加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外復(fù)制。( DNA高溫變性低溫復(fù)性)
       發(fā)現(xiàn)耐熱DNA聚合同酶--Taq酶對(duì)于PCR的應(yīng)用有里程碑的意義,該酶可以耐受90℃以上的高溫而不失活,不需要每個(gè)循環(huán)加酶,使PCR技術(shù)變得非常簡(jiǎn)捷、同時(shí)也大大降低了成本,PCR技術(shù)得以大量應(yīng)用,并逐步應(yīng)用于臨床。

注意事項(xiàng):1.基礎(chǔ)程序;2.?dāng)U增溫度和延伸溫度;3.反應(yīng)時(shí)間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應(yīng)液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應(yīng)動(dòng)力學(xué);8.PCR擴(kuò)增產(chǎn)物;9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。

產(chǎn)品名稱

英文名稱

貨號(hào)

 羊仰口線蟲PCR檢測(cè)試劑盒廠家

 Bunostomum trigonocephalumPCR

BK-P8941

原理是由一對(duì)引物介導(dǎo),能在動(dòng)植物體外對(duì)特定基因(DNA)片斷進(jìn)行快速酶促擴(kuò)增,經(jīng)過n個(gè)熱循環(huán)擴(kuò)增,擴(kuò)增產(chǎn)物中所含特定基因數(shù)是原始模板數(shù)的(1+E)n(0<E<1,擴(kuò)增效率=倍,使得檢測(cè)擴(kuò)增產(chǎn)物中的特定基因成為可能。
 特異性強(qiáng)
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對(duì)原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性;
?
實(shí)驗(yàn)過程:
一、試劑準(zhǔn)備
1. DNA模板
2.對(duì)應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無(wú)到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此,擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1(10pM)               2μl
引物2(10PM)              2μl
Taq酶(2U/μl)            1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl)    1 μl
ddH2O至               50 μl
PCR儀有無(wú)熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4.PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。

假絲酵母屬 Candida sp.DU 145, 人前列腺細(xì)胞

木耳 Auricularia auricula鼠李糖桿菌 Lactobacillus rhamnosus

血管緊張素原(AGT)重組蛋白英文名稱:Recombinant Angiotensinogen (AGT)

人高分化胃細(xì)胞英文名稱:NCI-N87

大鼠主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞

YM瓊脂/YM Agar霉菌/酵母菌和耐酸菌的分離培養(yǎng)250克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口

嗜酸桿菌 Lactobacillus acidophilus苜蓿中華瘤菌 Sinorhizobium meliloti

神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子4(NT4)重組蛋白英文名稱:Recombinant Neurotrophin 4 (NT4)

III型膠原酶(含10mL酶解緩沖)1mL

釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae嗜酸桿菌 Lactobacillus acidophilus

苜蓿中華瘤菌 Sinorhizobium meliloti釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

羊仰口線蟲PCR檢測(cè)試劑盒廠家人大細(xì)胞肺細(xì)胞苜蓿中華瘤菌 Sinorhizobium meliloti

日本霉 Rhizopus japonicus香菇 Lentinula edodes

U-937(人組織細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

豇豆慢生瘤菌 Bradyrhizobium vigna中慢生華癸瘤菌 Mesorhizobium huakuii

小鼠淋巴瘤細(xì)胞  EL4

人肺大靜脈平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基人腺細(xì)胞

ARPE-19(人視網(wǎng)膜上皮細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

10%鈉胰酪胨大豆肉湯 規(guī)格: 250g 用途: 用于金黃色葡萄球菌的多管發(fā)酵法測(cè)定及增菌培養(yǎng)(GB/T4789.10-2008)。

Primary Antibody Diluent/一抗稀釋(綠色)酸球菌亞種 Lactococcus lactis subsp.lactis

殺菌性/通透性增加蛋白(BPI)重組蛋白  Recombinant Bactericidal/Permeability Increasing Protein (BPI)

DU 145(人前列腺細(xì)胞)Calu-3(人肺腺細(xì)胞)

 

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