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球孢子菌通用PCR檢測試劑盒廠家

簡要描述:球孢子菌通用PCR檢測試劑盒廠家上海帛科生物相關產(chǎn)品:胎盤堿性磷酸酶(ALPP)重組蛋白 Recombinant Alkaline Phosphatase, Placental (ALPP)

棕櫚酰化膜蛋白2(MPP2)重組蛋白 Recombinant Membrane Protein, Palmitoylated 2

  • 產(chǎn)品型號:50次
  • 廠商性質(zhì):經(jīng)銷商
  • 更新時間:2023-12-16
  • 訪  問  量:308

詳細介紹

原理是由一對引物介導,能在動植物體外對特定基因(DNA)片斷進行快速酶促擴增,經(jīng)過n個熱循環(huán)擴增,擴增產(chǎn)物中所含特定基因數(shù)是原始模板數(shù)的(1+E)n(0<E<1,擴增效率=倍,使得檢測擴增產(chǎn)物中的特定基因成為可能。
 特異性強
PCR反應的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應的忠實性;

注意事項:1.基礎程序;2.擴增溫度和延伸溫度;3.反應時間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應液的配制;6.PCR技術的基本原理;7.PCR的反應動力學;8.PCR擴增產(chǎn)物;9.PCR反應體系與反應條件。

產(chǎn)品名稱

英文名稱

貨號

 球孢子菌通用PCR檢測試劑盒廠家

 Coccidioidesspp.PCR

BK-P9017

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實驗過程:
一、試劑準備
1. DNA模板
2.對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設計。因此,擴增不同的基因需要設計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1(10pM)               2μl
引物2(10PM)              2μl
Taq酶(2U/μl)            1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl)    1 μl
ddH2O至               50 μl
PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調(diào)整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結(jié)束反應,PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。

技術原理:
 DNA的半保留復制是生物進化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解鏈成單鏈,在DNA聚合酶與啟動子的參與下,根據(jù)堿基互補配對原則復制成同樣的兩分子挎貝。
       在聚合酶鏈式反應實驗中發(fā)現(xiàn),DNA在高溫時也可以發(fā)生變性解鏈,當溫度降低后又可以復性成為雙鏈。因此,通過溫度變化控制DNA的變性和復性,并設計引物做啟動子,加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外復制。( DNA高溫變性低溫復性)
       發(fā)現(xiàn)耐熱DNA聚合同酶--Taq酶對于PCR的應用有里程碑的意義,該酶可以耐受90℃以上的高溫而不失活,不需要每個循環(huán)加酶,使PCR技術變得非常簡捷、同時也大大降低了成本,PCR技術得以大量應用,并逐步應用于臨床。

Hela S3(人宮頸細胞)小鼠皮層神經(jīng)膠質(zhì)細胞(EGFP標記)

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小鼠白血病細胞英文名稱:L1210

WPMY-1(人正常前列腺基質(zhì)永生化細胞)釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

桿菌屬 Lactobacillus sp.釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

HT-29, 人結(jié)腸細胞

褐球固氮菌 Bacillus thuringiensis subsp. kumamotoensis鏈霉菌 Streptomyces sp.

人胃細胞異常漢遜酵母 Hansenula anomala

豇豆慢生瘤菌 Bradyrhizobium vigna惡臭假單胞菌 Pseudomonas putida

人非小細胞肺細胞英文名稱:NCI-H358

鈉結(jié)晶紫增菌/Sodium Chloride Violet Purple Enrichment Broth副溶血弧菌的選擇性增菌培養(yǎng)250克國產(chǎn)/進口

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明膠培養(yǎng)基/Gelatin Medium細菌明膠液化試驗250克國產(chǎn)/進口

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HT混合鹽/HT Media Supplement (50×) Hybri-Max™γ射線滅菌1vailSigmaH0137原裝

人腎皮層上皮細胞*培養(yǎng)基100mL

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窖蛋白(CAV1)重組蛋白  Recombinant Caveolin 1 (CAV1)

胎盤堿性磷酸酶(ALPP)重組蛋白  Recombinant Alkaline Phosphatase, Placental (ALPP)

棕櫚?;さ鞍?/font>2(MPP2)重組蛋白  Recombinant Membrane Protein, Palmitoylated 2 (MPP2)

NCI-H292(人肺細胞)5×106cells/瓶×2

 

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