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鵝細小病毒PCR檢測試劑盒說明書

簡要描述:鵝細小病毒PCR檢測試劑盒說明書上海帛科生物相關產品:釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae熱帶假絲酵母 Candida tropicalis

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  • 產品型號:50次
  • 廠商性質:經銷商
  • 更新時間:2023-12-17
  • 訪  問  量:308

詳細介紹

原理是由一對引物介導,能在動植物體外對特定基因(DNA)片斷進行快速酶促擴增,經過n個熱循環(huán)擴增,擴增產物中所含特定基因數是原始模板數的(1+E)n(0<E<1,擴增效率=倍,使得檢測擴增產物中的特定基因成為可能。
 特異性強
PCR反應的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結合;
②堿基配對原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應的忠實性;

注意事項:1.基礎程序;2.擴增溫度和延伸溫度;3.反應時間;4.循環(huán)次數;5.PCR 反應液的配制;6.PCR技術的基本原理;7.PCR的反應動力學;8.PCR擴增產物;9.PCR反應體系與反應條件。

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英文名稱

貨號

 鵝細小病毒PCR檢測試劑盒說明書

 Goose Parvoiruvs(GPV)PCR

BK-P9212

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實驗過程:
一、試劑準備
1. DNA模板
2.對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據你的模板鏈設計。因此,擴增不同的基因需要設計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1(10pM)               2μl
引物2(10PM)              2μl
Taq酶(2U/μl)            1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl)    1 μl
ddH2O至               50 μl
PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。

技術原理:
 DNA的半保留復制是生物進化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解鏈成單鏈,在DNA聚合酶與啟動子的參與下,根據堿基互補配對原則復制成同樣的兩分子挎貝。
       在聚合酶鏈式反應實驗中發(fā)現,DNA在高溫時也可以發(fā)生變性解鏈,當溫度降低后又可以復性成為雙鏈。因此,通過溫度變化控制DNA的變性和復性,并設計引物做啟動子,加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外復制。( DNA高溫變性低溫復性)
       發(fā)現耐熱DNA聚合同酶--Taq酶對于PCR的應用有里程碑的意義,該酶可以耐受90℃以上的高溫而不失活,不需要每個循環(huán)加酶,使PCR技術變得非常簡捷、同時也大大降低了成本,PCR技術得以大量應用,并逐步應用于臨床。

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鵝細小病毒PCR檢測試劑盒說明書卟啉鈷  791.77  Porphyrin cobalt*:28903-71-1分子量: C48H36CoN4O4

單硬脂酸鋁  344.47  Aluminium stearate*:7047-84-9分子量: C18H37AlO4

鈦粉  47.9  Titanium powder*:7440-32-6分子量: TI

十五烷  288.51  Fifteen benzene*:2131-18-2分子量: C21H36

6-喹喔啉  145.16  Aminoquinoxaline 6-*:6298-37-9分子量: C8H7N3

乙二丁  Ethylene glycol butyl ether  118.17分子量: C6H14O2*:111-76-2

十二氯三鈦鋁  596.12  Twelve chlorine three titanium*:12003-13-3分子量: AlCl12Ti3

2,6-二溴萘  285.96  2,6- dibromine naphthalene*:13720-06-4分子量: C10H6Br2

粘洋紅  Mucus magenta  分子量:*:51395-97-2

4,4',4',4'-四叔丁酞菁銅  4,4 ', 4', 4 '- Tetra tert butyl phthalocyanine copper  800.51分子量: C48H48CuN8*:39001-64-4

土荊皮乙  Soil Jing acid  432.464分子量:C23H28O8*:82508-31-4

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