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檸檬酸(CA)含量測(cè)試盒可見(jiàn)分光光度法

簡(jiǎn)要描述:檸檬酸(CA)含量測(cè)試盒可見(jiàn)分光光度法公司正在出售的產(chǎn)品:MC培養(yǎng)基 英文名稱(chēng):Chalmers Agar,Modified 產(chǎn)品規(guī)格:250g BLB瓊脂 英文名稱(chēng):BLB agar 產(chǎn)品規(guī)格:250g MRS瓊脂 英文名稱(chēng):MRS Agar 產(chǎn)品規(guī)格:250g LBS瓊脂 英文名稱(chēng):LBS agar 產(chǎn)品規(guī)格:250g

  • 產(chǎn)品型號(hào):
  • 廠(chǎng)商性質(zhì):經(jīng)銷(xiāo)商
  • 更新時(shí)間:2023-12-27
  • 訪(fǎng)  問(wèn)  量:646

詳細(xì)介紹

特別提醒:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測(cè)。

產(chǎn)品名稱(chēng):檸檬酸(CA)含量測(cè)試盒可見(jiàn)分光光度法

產(chǎn)品規(guī)格:50管/48樣

檢測(cè)方法:可見(jiàn)分光光度法

產(chǎn)品貨號(hào):BK-01S6574

產(chǎn)品分類(lèi):三羧酸循環(huán)系列
商品介紹:

測(cè)定意義:

CA又稱(chēng)枸櫞酸,廣泛存在于各種生物胞質(zhì)中,是生物體內(nèi)重要的有機(jī)酸。CA也存在于線(xiàn)粒體基質(zhì)中,是三羧酸循環(huán)步反應(yīng)的產(chǎn)物,與脂肪、蛋白質(zhì)和糖最終轉(zhuǎn)化為二氧化碳密切相關(guān)。

測(cè)定原理

酸性條件下,檸檬酸可將Cr6+還原成Cr3+,在545nm處有特征吸收峰;通過(guò)測(cè)定545nm吸光值的增加,即可計(jì)算出樣品中檸檬酸含量。

實(shí)驗(yàn)中所需儀器及設(shè)備

可見(jiàn)分光光度計(jì)、低溫離心機(jī)、掌上離心機(jī)、可調(diào)式移液槍、1ml玻璃比色皿、雙蒸水

所需的儀器和用品:

可見(jiàn)分光光度計(jì)、1mL 玻璃比色皿(光徑 1cm)、低溫離心機(jī)、移液器、研缽、冰和蒸餾水

四、超氧化物歧化酶(SOD)的測(cè)定:

建議正式實(shí)驗(yàn)前選取 2 個(gè)樣本做預(yù)測(cè)定,了解本批樣品情況,熟悉實(shí)驗(yàn)流程,避免實(shí)驗(yàn)

樣本和試劑浪費(fèi)!

1、樣本制備

組織樣本:

取約 0.1g 組織(水分充足的樣本可取 0.25g),加入 1mL 提取液,在 4oC 或冰浴進(jìn)行

勻漿(或使用各類(lèi)常見(jiàn)勻漿器)。4oC×12000rpm 離心 10min,取上清作為待測(cè)液。

【注】:若增加樣本量,可按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)15~10 的比例進(jìn)行提取

 

細(xì)菌/細(xì)胞樣本:

先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;取約 500 萬(wàn)細(xì)菌或細(xì)胞加入 1mL

提取液,超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(冰浴,功率 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復(fù) 30 次);

12000rpm 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測(cè)。

【注】:若增加樣本量,可按照細(xì)菌/細(xì)胞數(shù)量(10

4):提取液(mL)為 500~10001 的比例進(jìn)行提取。 液體樣本:直接檢測(cè);若渾濁,離心后取上清檢測(cè)。

QQ截圖20220307153537.png 

實(shí)驗(yàn)方法學(xué):

一、肝素的配制:

市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱(chēng)取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤(rùn)管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會(huì)凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些??梢匀?.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。

肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤(rùn)管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉(zhuǎn)動(dòng),每隔5~10分鐘轉(zhuǎn)動(dòng)一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。

二、血液樣本的收集:

全血根據(jù)收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時(shí),不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱(chēng)之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱(chēng)之為血漿。

1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時(shí),直接低速離心分離出血清待用或保存。

2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時(shí)左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實(shí)驗(yàn)室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA及。

選擇抗凝的注意點(diǎn):

①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;

②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;

③、抗凝全血收集的血漿相對(duì)較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);

④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后

用于測(cè)定。

0.1mL×10 0化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞 0 Competent Cell -80℃保存

2 ug pNTAP- B pNTAP- B 低溫運(yùn)輸,-20℃保存

MS培養(yǎng)基(不含瓊脂和蔗糖)  250g

2 ug pLVX-IRES-ZsGreen1 pLVX-IRES-ZsGreen1 低溫運(yùn)輸,-20℃保存

XLT4瓊脂 XLT4 Agar 250g

10mL 弗氏*佐劑 Freund Adjuvant Complete 4℃保存

50T 古典豬瘟病毒PCR檢測(cè)試劑盒  低溫運(yùn)輸,-20℃保存

200mL HRP 穩(wěn)定劑/ 稀釋劑 HRP Stablizing Solution -20℃保存

2 ug YEP365 YEP365 低溫運(yùn)輸,-20℃保存

10g 酸洗玻璃珠(直徑:800μm)  常溫

2 ug pAcHLT-B pAcHLT-B 低溫運(yùn)輸,-20℃保存

檸檬酸(CA)含量測(cè)試盒可見(jiàn)分光光度法Securin/PTTG  垂體瘤轉(zhuǎn)化基因抗體 規(guī)格: 0.1mlALR  肝再生增強(qiáng)因子抗體 規(guī)格: 0.1ml

BMP10  骨形態(tài)發(fā)生蛋白10抗體 規(guī)格: 0.2mlIGFBP9/CCN3  胰島素樣生因子結(jié)合蛋白9 規(guī)格: 0.1ml

Smad2  細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)分子Smad-2抗體 規(guī)格: 0.1mlPOT1  端粒保護(hù)蛋白1抗體 規(guī)格: 0.2ml

MTTP  微粒體甘油三酯轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白 規(guī)格: 0.2mlAnnexin A8  膜粘連蛋白8抗體 規(guī)格: 0.1ml

PCDHA3  原鈣粘附蛋白α3抗體 規(guī)格: 0.2mlMouse Anti-human IgG/HRP  辣根過(guò)氧化物標(biāo)記的小鼠抗人IgG 規(guī)格: 0.1ml

DEPTOR/DEPDC6  DEPTOR蛋白抗體 規(guī)格: 0.2mlRb/P105 RB  成視網(wǎng)膜細(xì)胞瘤基因抗體 規(guī)格: 0.1ml

phospho-EphB1/Eph receptor B1(Tyr317)  磷酸化酪蛋白激受體B1抗體 規(guī)格: 0.1mlDHRS7  視網(wǎng)膜短鏈脫/還原家族7抗體 規(guī)格: 0.2ml

Rabbit Anti-Mink IgG/PE-CY5  PE-CY5標(biāo)記的兔抗水貂IgG 規(guī)格: 0.1mlGMCL1L  生細(xì)胞樣蛋白1樣蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml

Phospho-CEBP beta (Ser105)  磷酸化轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子CEBP β抗體 規(guī)格: 0.1mlC12ORF68  12號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框68抗體 規(guī)格: 0.2ml

C4orf42  4號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框42抗體 規(guī)格: 0.2mlPhospho-SirT1 (Ser27)  磷酸化沉默調(diào)節(jié)蛋白1抗體 規(guī)格: 0.1ml

IDE  胰島素降解抗體 規(guī)格: 0.2mlIL-29/IFNL1  白細(xì)胞介素29抗體 規(guī)格: 0.2ml

TRAP/Tartrate Resistant Acid Phosphatase  端粒調(diào)節(jié)相關(guān)蛋白抗體 規(guī)格: 0.1ml 

注意事項(xiàng):

1、試劑二為酶,不可冷凍,使用時(shí)在冰上放置。

2、對(duì)照管只需要做一管。

3、若對(duì)照管吸光值大于2,建議將試劑二用蒸餾水稀釋7倍后使用(10μl試劑二原液+60μl蒸餾水)。

4、SOD為什么有的樣本測(cè)定管大于對(duì)照管,對(duì)照管數(shù)值在什么范圍?

對(duì)照管的范圍是0.8-2。對(duì)照管吸光值過(guò)低可能是(1)試劑二或試劑四沒(méi)有現(xiàn)配現(xiàn)用;(2)沒(méi)有按順序加試劑;(3)反應(yīng)時(shí)間不夠,可以延長(zhǎng)反應(yīng)時(shí)間(反應(yīng)時(shí)間30min可以延長(zhǎng)到40min)。對(duì)照管吸光值過(guò)高可能是試劑二未按操作說(shuō)明書(shū)稀釋相應(yīng)倍數(shù)。

若出現(xiàn)測(cè)定管大于對(duì)照管,可能是樣本中雜質(zhì)的影響太大,為了降低雜質(zhì)的影響一般將樣本提取上清液用蒸餾水或提取液稀釋10倍后再測(cè),通??梢允箿y(cè)定正常。計(jì)算公式中乘以相應(yīng)稀釋倍數(shù)。

 


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